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喹乙醇检测试剂盒样本前处理

日期:2018-10-25浏览:50次

   喹乙醇又称喹酰胺醇,商品名为倍育诺、快育灵,由于喹乙醇有中度至明显的蓄积毒性,对大多数动物有明显的致畸作用,对人也有潜在的三致性,即致畸形,致突变,致癌,因此喹乙醇在美国和欧盟都被禁止用作饲料添加剂。
  喹乙醇检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被偶联抗原,样本中残留的喹乙醇和酶标板微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗喹乙醇的抗体,加入酶标二抗后,用TMB底物显色,样本吸光度值与其所含残留物喹乙醇的含量成负相关,与标准曲线比较,再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样本中喹乙醇的残留量。
  喹乙醇检测试剂盒样本前处理
  1、样本处理前须知:
  实验器具必须洁净并使用一次性吸头,以避免污染干扰实验结果。
  2、配液:
  配液1:样品提取液
  根据需要量取甲醇用去离子水按甲醇:水=0.5:9.5稀释,混匀备用。
  配液2:复溶液
  将2×复溶液用去离子水2倍稀释,用于样本的复溶,复溶液在4℃环境可保存一个月。
  3、样本前处理步骤:
  3.1 组织(猪肝、猪肉等)样本
  1)称取2±0.05g去除脂肪的匀浆样品,加入2ml去离子水、8ml乙腈,充分混匀后置56℃水浴10min,振荡5min,室温4000r/min以上离心10min;
  2)取5ml上清液于50-60℃氮气或空气下吹干。
  3)用1ml样本复溶液溶解干燥物,加2ml正己烷,充分混匀,室温4000r/min以上离心5min;
  4)去除上层有机相,取下层液50ul用于分析。
  样本稀释倍数:1     检测下限:0.3ppb
  3.2 饲料样本
  1)称取称1±0.05g研碎的饲料样品,加入10ml样品提取液,充分混匀后置56℃水浴10min,震荡5min,室温4000r/min以上离心10min;
  2)取50ul上清液,加入450ul样本复溶液稀释,混匀;
  3)取2)中稀释的上清液50ul用于分析。
  样本稀释倍数:100     检测下限:30ppb

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